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不同添加水平的植物乳杆菌对肉鸡生产性能和免疫机能的影响
作者:   时间:2012-10-30

 


刘乃芝 ,陈静,崔诗法,闫福海,谷巍
(山东宝来利来生物工程股份有限公司,山东 泰安271000)

   摘要:本试验通过在基础日粮中添加不同水平的植物乳杆菌,研究其对肉鸡生长性能和免疫机能的影响,进而确定植物乳杆菌在肉鸡生产上的最佳添加剂量。选用1日龄健康爱拔益加肉雏鸡420只,随机分成7组,每组3个重复,每个重复20只鸡。一个对照组:饲喂基础日粮;六个乳酸菌添加组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ):分别在基础日粮中添加1.0‰、2.0‰ 、4.0‰、6.0‰、8.0‰、1.0%的植物乳杆菌。试验期42天,乳酸菌制剂以饮水方式供给。分别在(7)、14、21、28、35、42日龄测定并记录各组的体重、采食量、料肉比、血清总蛋白含量、IgG含量及NDV抗体效价。结果表明:不同添加水平的乳酸菌都在一定程度上提高了肉鸡的生产性能和免疫性能,整体来看,2.0‰植物乳杆菌添加组综合效果最好。
   关键词:植物乳杆菌;肉鸡;生产性能;免疫性能

   Effects of Lactobacillus Plantarum with diferent supplemental levels on growth performance and immunity function of broilers
          LIU Nai-zhi,CHEN Jing,CUI Shi-fa,YAN Fu-hai,GU Wei
         (Shandong BaoLai-LeeLai bioengineering Co. Ltd, Tai an, Shandong. 271000)
   Abstract: The experiment was conducted to study the effects of Lactobacillus plantarum with diferent supplemental levels on growth performance, immune function of broilers. The objective of this study was to compare the application effects to find the suitable supplemental level of broilers. A total of 420 one -day -old healthy AA broilers were randomly assigned to 7 groups with 3 replicates per group and 20 broilers per replicate. The experimental treatments were divided as follows: The broilers in the control group were only fed a basal diet.Six groups were Lactobacillus plantarum groups. 1.0‰、2.0‰ 、4.0‰、6.0‰、8.0‰、1.0%Lactobacillus plantarum were respectively added in Lactobacillus groups.The experiment lasted for 42 days. All Lactobacillus plantarum of evey group were suppled in water for broilers. Weight gain, feed intake,feed/gain ratio, antibody level of NDV ,and the contents of total protein and IgG were determined at (7)、14、21、28、35、42-day.The results showed as follows:All Lactobacillus plantarum groups could increase growth performance, immune function of broilers to some degree.On the whole,the effect of 2.0‰ Lactobacillus plantarum group was better than any other groups.
   Key words: Lactobacillus plantarum; broilers; growth performance;immune function

   鸡消化道内的菌群定植需要一个过程,3~7日龄是雏鸡肠道内菌群形成阶段,7~16日龄雏鸡消化道内的正常菌群基本完成[1],而在此之前,有益菌群未完全定植于肠道上皮细胞,容易受到外界病原菌的侵害,因此大部分的养殖者便采用抗生素来预防。但近年来,随着抗生素的耐药性和内源性感染等问题的日益严重,以及人类对食品安全意识的逐渐提高,世界各国都在相继立法,限制部分或完全禁止抗生素用作饲料添加剂[2]微生态制剂作为替代饲用抗生素的添加剂,正凭借其安全、优质、无公害及有效的促生长作用被越来越多的人所认可。我国农业部公告(第318号)批准使用的微生物饲料添加剂有15种[3]植物乳杆菌(Lactobacillus Plantarum)便是其中一种,其能分解食物中的蛋白质和糖类、合成维生素,能显著提高食物生物效价,促进消化吸收。前人对于乳酸菌对动物机体的影响研究已比较多,但是对于不同添加水平的植物乳杆菌对肉鸡生产性能和免疫机能影响的研究还较少。本试验旨在对肉鸡饲喂不同添加水平的植物乳杆菌,研究其分别对肉鸡增重、采食量、料重比、血清总蛋白含量、IgG含量及NDV抗体效价的影响,以确定植物乳杆菌在肉鸡生产上的最佳添加剂量,为其在动物生产中的推广和应用提供科学依据。由于乳酸菌受外界环境的影响较大,容易失活,因此本实验并未采用将植物乳杆菌添加到饲粮中饲喂鸡只,而是将其溶解在清水中供饮用,现用现配,确保了植物乳杆菌的有效活性。
1 材料与方法
1.1 实验材料
   微生态制剂:本试验选用的乳酸菌制剂是由山东宝来利来生物工程股份有限公司提供的植物乳杆菌干粉。
试验动物:1日龄健康爱拔益加(AA)肉雏鸡420只,购自山东民和牧业股份有限公司。
1.2 试验方法
1.2.1 试验设计与分组
   本试验选用健康体重状况基本相同的1日龄AA肉鸡420羽。随机分成7组,每组3个重复,每个重复20只。一个对照组:饲喂基础日粮;六个(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ)微生态制剂组,在饲喂基础饲粮的同时,每日分别定时在饮水中添加1.0‰、2.0‰、4.0‰、6.0‰、8.0‰、1.0%的植物乳杆菌,之前需禁水0.5h,确保乳酸菌在最短时间内全部被鸡只摄入,之后再补充清水。试验期42天。
1.2.2 试验日粮
   基础日粮是参照AA肉鸡营养标准配制而成的玉米-豆粕型全价料,按第一(1~14日龄)和第二(15~42日龄)两个阶段配制,不添加任何抗生素、药物及微生态添加剂。
1.2.3 饲养管理
   所有参试鸡采用笼养方式。鸡只自由采食、充足饮水。红外灯控温,持续光照,水槽及粪便每天各清理一次。每天观察鸡只健康情况,记录病死鸡数。按常规程序进行饲养管理。
免疫程序:分别于7和21日龄,按规定剂量和方法对鸡进行新城疫疫苗的滴鼻点眼免疫;14日龄时,进行法氏囊滴鼻点眼免疫。疫苗均购自扬州威克生物工程有限公司。
1.2.4 样品采集及检测指标
   (1)生长指标的测定:分别于7、14、21、28、35、42日龄清晨(禁食12h,仅供饮水)以重复组为单位称量各组鸡的空腹总重量、饲料剩余量,计算各组各阶段及整个过程的平均增重、采食量、料重比。
   (2)血清总蛋白和IgG含量的测定:分别于14、21、28、35、42日龄清晨(禁食12h,仅供饮水)以重复组为单位,从中随机选取2只接近平均体重的健康鸡只,颈静脉无菌采血,常规方法分离血清,一部分血清利用全自动生化分析仪测定血清总蛋白和IgG的含量,另一部分,按照血凝抑制试验的标准检测血清中的NDV抗体效价。
1.2.5 数据处理
   采用SPPS17.0软件One-Way ANOVA对上述数据进行方差分析,用Dun-can’s方法进行多重比较。试验数据用平均数M±标准差 SD 表示。
2 结果与分析
2.1植物乳杆菌对肉鸡生产性能的影响
表1 植物乳杆菌对肉鸡料肉比的影响
Table 1 Effect of Lactobacillus plantarum on the feed/gain ratio of broilers
日龄
组别
对照组
Ⅰ组
Ⅱ组 Ⅲ组 Ⅳ组 Ⅴ组 Ⅵ组
1~7
0.71±0.09
0.72±0.06
0.76±0.04
0.74±0.17
0.74±0.25
0.71±0.16
0.73±0.02
8~14
1.36±0.08a
1.25±0.22ab
1.15±0.02b
1.33±0.06ab
1.21±0.01ab
1.24±0.03ab
1.16±0.08b
15~21
1.72±0.14a
1.50±0.00b
1.48±0.09b
1.55±0.15ab
1.57±0.03ab
1.59±0.15ab
1.57±0.23ab
22~28
1.77±0.15a
1.60±0.07ab
1.62±0.19ab
1.78±0.08a
1.64±0.57ab
1.54±0.42b
1.63±0.30ab
29~35
1.89±0.19ab
1.85±0.06ab
1.74±0.33a
1.93±0.02b
1.89±0.02ab
1.84±0.05ab
1.82±0.11ab
36~42
2.09±0.06a
1.89±0.26ab
1.90±0.34ab
2.03±0.16ab
2.12±0.20a
1.82±0.48b
2.02±0.11ab
   注:同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(p<0.05),相同小写字母或无字母表示差异不显著(p>0.05)。下表同。
Note:In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (p<0.05),while with same small letter or no letter superscripts mean no significant difference(p>0.05).The same as below.
   由表1可知,料肉比是随着日龄的增加而增加的,整个过程中,除了22~35日龄Ⅲ组高于对照组(不显著,Ρ>0.05)和36~42日龄Ⅳ组高于对照组(Ρ>0.05)以外,各添加组在任意阶段的料肉比都低于对照组,而且,8~14日龄,Ⅱ组和Ⅵ组料肉比显著低于对照组(Ρ<0.05),15~21日龄,Ⅰ组和Ⅱ组显著低于对照组(Ρ<0.05),22~28日龄,试验Ⅴ组显著低于Ⅲ组和对照组(Ρ<0.05),36~42日龄,Ⅴ组显著低于Ⅳ组和对照组(Ρ<0.05),可见各种添加水平的乳酸菌对降低料肉比都有一定的效果,尤其在21日龄之前,所有乳酸菌添加组的料肉比均低于对照组,各添加组之间相比较以试验Ⅱ组效果最好。
表2 植物乳杆菌对肉鸡生产性能的影响
Table 2 Effect of Lactobacillus plantarum on the growth performance of broilers
项目
组别
对照组
Ⅰ组
Ⅱ组 Ⅲ组 Ⅳ组 Ⅴ组 Ⅵ组
1~42日龄平均增重(kg)
1.89±0.029a
1.99±0.087ab 2.06±0.092b 2.00±0.056ab 1.91±0.040ab 2.02±0.052ab 1.92±0.089ab
1~42日龄平均采食量(kg) 3.44±0.031 3.38±0.021 3.42±0.018 3.58±0.016 3.36±0.024 3.45±0.010 3.40±0.028
1~42日龄料肉比 1.82±0.032a 1.70±0.008ab 1.66±0.012b 1.79±0.023ab 1.76±0.015ab 1.71±0.051ab 1.77±0.043ab
   从表2可以看出,1~42日龄各添加组平均增重均高于对照组,且随着添加浓度的增加,Ⅰ组~Ⅵ组总体呈先升高后降低再升高降低的趋势,分别比对照组高出5.29%、8.99%、5.82%、1.06%、6.88%、1.59%,只有实验Ⅱ组与对照组相比差异显著(Ρ<0.05)。各添加组的总料肉比均低于对照组,随着添加量的不断增加,总体呈现先降低升高再降低升高的趋势,各添加组分别比对照组低出6.59%、9.89%、1.65%、3.30%、6.04%、2.75%。其中以实验Ⅱ组的料肉比最低且差异显著(Ρ<0.05),其次是实验Ⅰ组和Ⅴ组。
   整体来看,不同添加水平的乳酸菌制剂均可以在一定程度上提高鸡增重,降低料肉比,但各添加水平之间效果不尽相同,以试验Ⅱ组的效果最好,Ⅱ组在28日龄之前的料肉比与对照组相比差异显著(Ρ<0.05),1~42日龄平均增重和总料肉比也显著优于对照组(Ρ<0.05)。
2.2 植物乳杆菌对肉鸡血清总蛋白含量的影响
表3 植物乳杆菌对肉鸡血清总蛋白含量的影响(g/L)
Table 3 Effects of Lactobacillus plantarum on the contents of Total protein in serum of broilers
日龄
组别
对照组
Ⅰ组
Ⅱ组 Ⅲ组 Ⅳ组 Ⅴ组 Ⅵ组
14 16.48±2.88a 17.78±4.08ab 21.45±2.77b 21.62±6.39b 16.50±1.32ab 20.40±4.29ab 20.58±2.64ab
21 17.87±2.67a 22.62±4.24b 23.67±4.83b 22.21±5.47b 17.87±6.95ab 21.52±2.18ab 19.87±5.94ab
28 22.93±1.00a 25.93±2.41ab 26.41±1.47ab 26.53±1.13ab 27.39±1.90b 23.90±2.07ab 24.13±0.83ab
35 26.89±2.59 29.23±3.64 30.25±1.35 27.41±2.18 27.69±1.83 27.03±1.10 29.07±2.09
42 30.03±1.08 30.82±0.41 32.61±2.06 33.58±9.08 33.20±6.01 31.81±5.74 31.35±4.48
   由表3可知,14~42日龄各添加组的血清总蛋白含量均高于对照组。其中,第14日龄时,试验Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组( P< 0. 05), 21日龄时,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组显著高于对照组( P< 0. 05),28日龄时,Ⅳ组显著高于对照组( P< 0. 05)。35日龄及之后,各添加组之间以及与对照组之间差异均 不显著( P> 0. 05)。从整体情况来看,随着日龄的不断增加各组的血清总蛋白含量都是上升趋势的,以试验Ⅱ组和Ⅲ组的提高血清总蛋白含量的效果最好,在21日龄之前均显著高于对照组。
2.3 植物乳杆菌对肉鸡血清中IgG含量的影响
表4植物乳杆菌对肉鸡血清中IgG含量的影响(mg/mL)
Table 4 Effects of Lactobacillus plantarum on the contents of IgG in serum of broilers
日龄
组别
对照组
Ⅰ组
Ⅱ组 Ⅲ组 Ⅳ组 Ⅴ组 Ⅵ组
14 1.82±0.112b 1.72±0.046ab 2.67±0.031a 2.54±0.030a 1.96±0.079ab 2.33±0.025ab 2.01±0.042ab
21 2.09±0.014c 2.86±0.004b 3.76±0.017a 3.26±0.013ab 3.14±0.012abc 2.54±0.070abc 2.24±0.089abc
28 3.46±0.063b 3.28±0.029ab 4.75±0.010a 4.44±0.082a 3.66±0.052ab 3.69±0.057ab 4.01±0.052ab
35 4.34±0.019ab 4.13±0.320b 5.34±0.078ab 5.56±0.027a 4.69±0.027ab 4.99±0.227ab 4.88±0.319ab
42 5.03±0.236 5.34±0.019 6.38±0.733 6.20±0.526 5.29±0.095 5.38±0.052 5.99±0.256
   由表4可知,除了14日龄、28日龄和35日龄时,Ⅰ组低于对照组以外,各添加组在任意时段的IgG含量均高于对照组,其中,14日龄时Ⅱ组和Ⅲ组显著,高于对照组(Ρ<0.05)。21日龄时,Ⅱ组显著高于Ⅰ组,且Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组均显著高于对照组(Ρ<0.05)。28日龄时,Ⅱ组和Ⅲ组显著高于对照组(Ρ<0.05)。因此,整体来看,整个过程中以Ⅱ组和Ⅲ组对提高血清中IgG含量效果最好,在28日龄之前均显著高于对照组(Ρ<0.05)。
2.4 植物乳杆菌对肉鸡NDV效价的影响
表5 植物乳杆菌对肉鸡NDV效价的影响
Table 5 Effects of Lactobacillus plantarum on HI antibody level of NDV in serum of broilers
日龄
组别
对照组
Ⅰ组
Ⅱ组 Ⅲ组 Ⅳ组 Ⅴ组 Ⅵ组
14 4.25±0.112 4.50±0.046 5.25±0.031 5.50±0.030 4.75±0.079 5.00±0.025 4.75±0.042
21 4.00±0.014a 4.75±0.004ab 5.75±0.017b 6.00±0.013b 5.25±0.012ab 5.50±0.070ab 5.00±0.080ab
28 4.75±0.063 5.50±0.029 6.25±0.010 6.50±0.082 5.75±0.052 5.75±0.057 5.75±0.052
35 4.75±0.019 6.25±0.320 6.75±0.078 7.00±0.027 6.50±0.027 5.75±0.227 6.00±0.319
42 4.5±0.236a 6.00±0.019ab 6.75±0.733b 6.75±0.526b 7.00±0.09b 6.00±0.052ab 6.25±0.256ab
   从表5可以看出,14~42日龄各添加组的NDV效价均高于对照组。其中,21日龄时,Ⅱ组和Ⅲ组NDV效价显著高于对照组(Ρ<0.05)。42日龄时,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组显著高于对照组(Ρ<0.05)。其他时间各添加组之间以及与对照组之间差异均不显著。从表中我们还可以看出,随着日龄的不断增长,对照组的NDV效价是先降低后升高降低的,这是因为7日龄和21日龄对鸡进行了新城疫滴鼻点眼免疫,7日龄免疫完之后,7日龄~14日龄,NDV效价应该是逐渐上升,14日龄之后有下降的趋势,到21日龄时,又加强了对新城疫的免疫,NDV效价逐渐上升,35日龄之后出现下降的趋势。各植物乳杆菌的 添加组,则是随着日龄的增长,一直处于上升的趋势,35日龄之后趋于稳定,并且各添加组在任意时刻的NDV效价均高于对照组,尤其以Ⅲ组和Ⅱ组的效果最好。
3 讨论
3.1 植物乳杆菌对肉鸡生长性能的影响
   肠道中的许多微生物都可以产生淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等消化酶,有利于营养物质的分解、吸收和转化,可提高饲料的转化率、促进动物生长和增重。Kalavathy等[4]研究表明,饲喂0.1 %乳酸菌混合物可显著降低雏鸡1~21d的料肉比和提高日增重。石峰等[5]研究发现,饲喂肉鸡时添加0.3%的乳酸菌微生态制剂,对肉鸡的生长和免疫功能有明显的促进作用。马治宇[6]试验发现,肉鸡饲料中添加乳酸菌菌粉、菌液可极显著(P<0.01)提高雏鸡1~4 周的日增重和饲料利用率,与陈馨[7]、王晶等[8]、徐基利[9]等得到的结果相似。本试验结果表明,不同添加水平的乳酸菌制剂均可以在一定程度上提高肉鸡的生长性能,提高平均增重,降低料肉比,但各添加水平之间效果又不尽相同,尤其以实验Ⅱ组的效果最好,28日龄之前的料肉比与对照组相比差异显著(Ρ<0.05),Ⅱ组在整个实验过程中的平均增重和料肉比也显著优于对照组(Ρ<0.05)。
3.2 植物乳杆菌对肉鸡血清总蛋白含量和IgG的影响
   乳酸菌能通过淋巴循环活化全身的免疫防御系统,激发机体的体液免疫和细胞免疫,诱导干扰素、白细胞介素等细胞因子的产生,刺激肠道产生黏膜抗体,增强机体抑制癌细胞增殖的能力,从而提高机体局部免疫功能力,抵御感染。Huang[10]等研究发现,添加无活性嗜酸性乳酸杆菌可显著提高肉仔鸡30日龄血清IgA和IgG水平。王晶[8]在饮水中添加同源乳酸菌液饲喂肉仔鸡后发现, 试验组血清中IgG和 IgA 含量均显著高于对照组。本试验中血清总蛋白含量的测定结果表明,各添加组在任何时期的清总蛋白含量均高于对照组,在试验整个过程中,以试验Ⅱ组的效果最好,而且在21日龄之前显著高于对照组(Ρ<0.05);IgG含量的测定结果表明,除了14、28和35日龄时,Ⅰ组低于对照组以外,各添加组在任意时段均高于对照组,以Ⅱ组和Ⅲ组效果最好,尤其在28日龄之前均显著高于对照组(Ρ<0.05)。
3.3 植物乳杆菌对肉鸡新城疫疫苗免疫后NDV效价的影响
   张七斤等[11]利用两株乳酸杆菌L.casei.zhang和MG2-1制成乳酸菌液和发酵乳以不同的剂量灌服给雏鸡,在10日龄和28日龄进行两次新城疫疫苗(IV系)滴鼻点眼免疫,在二免后的第7天和14天检测血凝抑制效价,发现与对照组相比,试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平0.61~1.77(log2)。司振书等[12]报道,饲喂微生态制剂后,350日龄及380日龄时试验组血清中新城疫血凝抑制抗体效价分别高出对照组25.81%和25.42%。
李路胜[13]等研究发现,55 日龄乳酸菌发酵组较抗生素组的新城疫抗体效价有显著的提高,说明乳酸菌与抗生素相比可通过促进免疫细胞活性、刺激体液免疫来改善机体的免疫水平。本试验结果表明,各植物乳杆菌的添加组随着日龄的增长,一直处于上升的趋势,35日龄之后趋于稳定,并且各添加组在任意时刻的NDV效价均高于对照组,尤其以Ⅲ组和Ⅱ组的效果最好。植物乳杆菌之所以能提高肉鸡循环血液中的抗体水平,并且能长时间的保持较高水平,延缓抗体水平下降,这可能是因为乳酸菌制剂中的细菌本身或细胞壁成分刺激宿主细胞,激活免疫系统,使机体的免疫功能始终处在较高的活性状态,有更多的淋巴细胞发育成浆细胞产生抗体,从而提高机体抗体水平,增强抵抗力[14]。
4.结论
   各添加水平的植物乳杆菌均能不同程度地提高肉鸡的生产性能和免疫性能,但并非添加量越多越好,综合考虑,以2.0‰的植物乳杆菌添加组效果最好。

参考文献:
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